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超低溫保存的應用及注意事項

時間:2018-05-18 10:09來源: 作者:秩名 點擊:

超低溫保存應用:適應于一系列細胞、組織和有機體(例如細菌、酵母、血紅細胞、雜交瘤、哺乳動物配子和高等植物培養細胞),并且已成功地開發其商業價值,特別是牛精zi和胚胎,以及最近的軟體動物幼體。冰凍配子和胚胎在人類生育管理上的作用也變得越來越重要了。自增壓液氮罐

冰凍和解凍對大多數細胞都是嚴重的脅迫,通過控制冷凍和解凍的速度、以及改變細胞和細胞質的化學環境來改變。冰凍配子和胚胎在人類生育管理上的越來越重要。了解超低溫保存的注意事項:

在冰凍過程中,主要的脅迫來自:暴露在低溫下;冰晶的機械、物理效應;胞外溶液性質的改變;胞內溶液類似性質的改變。

超低溫損傷的一個原因,可能是細胞本身沒有結冰時溫度下降對細胞結構和功能的影響。若發生這種直接的低溫損傷,則在降溫過程中會很快地表現出來并取決于冷凍速度,隨冷凍速度增加而增加。這種損傷在很多細胞包括細菌、酵母、原生生物、藻類、高等植物和哺乳類細胞系中都可觀察到。

在水溶液環境的細胞系統中,冷凍速度慢將導致胞外結冰,而細胞未結冰,不過已處于超冷卻狀態(即處于溶液冰點以下,但無冰晶形成)。胞外結冰的主要后果是溶質從冰晶中排出,并在剩余的液體部分積累。這小部分溶液很快積累大量溶質,因而對細胞造成了高滲環境,以致未結冰細胞的滲透脅迫也就增加 (圖1)。細胞的反應表現為失水、體積減少,并且因細胞膜的表面積減少可能遭受一系列機械損傷。這些損傷包括由于細胞收縮引起質膜物質丟失,這可能導致解凍過程中隨著細胞恢復其原來的體積而發生胞溶作用。顯然,在這種低溫脫水過程中,未冰凍細胞的細胞質將更加濃縮,其細胞器將和整體細胞一樣遭受后面損傷性的滲透脅迫效應。細胞外的冰晶和未結冰溶液將同時存在,直至達到溶液的共溶溫度,在這種溫度下,溶質開始晶體化。自增壓液氮罐

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