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液氮凍存細胞種在-80℃低溫冷凍保藏

時間:2023-09-13 14:21來源:班德公司 作者:小編 點擊:

  將菌種保存在-80℃冰箱中,以緩解細胞生理活動的冷凍。液氮罐制造商分享如下操作步驟:

  先做好安瓿管的準備

  安瓿管材料應為中性玻璃。清洗安瓿管時,用2%硫酸浸泡一夜。自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性。干燥后,貼上標簽,標明菌號和時間。加入脫脂棉塞后,在121℃下進行高壓滅菌(15℃)~20)min,備用。

  如何利用液氮將菌種冷凍在-80℃

  其次,要做好保護劑的選擇準備

  保護劑的類型應根據微生物的類型進行選擇。制備保護劑時,應注意其濃度和pH值,以及滅菌方法。如血清,可過濾滅菌;牛奶應先脫油,用離心法去除上油,一般在100℃間歇煮2~3次,每次(10~30)min,備用。自增壓液氮罐

  今后,要注意微生物保存物的準備

  在*適當的培養條件下,將細胞培養到靜止期或成熟期,經過純度檢查,與保護劑攪拌均勻,分裝。微生物培養物濃度應低于細胞或細胞(108-1010)個/ml(大腸桿菌)(Escherichiacoli)例如,為了獲得每毫升1010個活細胞菌液2ml~2.5mL,只有兩個10ml瓊脂斜坡)。

  選擇較長的毛細滴管,直接滴入安瓿管底部,切記不要濺到上管壁上,每管裝配量約(0.1~0.2)mL,如果是球形安瓿管,則裝載量為半個球。如果是液體培養的微生物,應離心去除培養液,然后將培養物與保護劑混合,然后放入安瓿管中。安瓿管的分裝時間應盡可能短,*幸運的是(1)~2)ml內分裝并預凍。分裝時應注意在無菌環境中操作。自增壓液氮罐

  然后進行凍結保存

  將安瓿管或塑料冷凍管儲存在-80℃的環境中。

  我們還必須知道,如果我們想在冷藏后取出復蘇方法。從冰箱中取出安瓿管或塑料冷凍管,應立即放置38℃~40℃水浴迅速恢復,適當快速搖晃。直到內部凍結完全溶解,約需50s~100s。打開安瓿管或塑料冷凍儲存管,將內容物移至適當的培養液中進行培養。


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