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如何解決在攻擊菌制備過程中出現的問題

時間:2019-05-14 10:19來源: 作者:班德液氮罐 點擊:
用原來的傳代法制備的攻擊菌不但菌種的消費大,而且因傳代培養基的不同而各批間的效價檢測結果會有差異。而液氮保存攻擊菌解決了以上的問題。自增壓液氮罐

試驗表明,將攻擊菌復蘇、傳代(3~9代)、分裝并保存在液氮中,攻擊菌仍然保持原有的生物學特性,符合《中華人民共和國藥典》〔K〕中攻擊菌的LD50為100~1000/MLD的要求,可用于無細胞百日咳效力檢定。

且有較好的穩定性,該法制備的攻擊菌用于檢定可減少人力、物力并節省時間,降低生產成本,提高工作效率,并能使每批的檢定結果不因攻擊菌的變化而受影響。因同批制備的攻擊菌支間差異不顯著,從而更能準確地反映制品的真實效價結果。

在攻擊菌制備過程中,通過多次反復試驗取得了一些經驗,現表述如下:

1、在制備過程中攻擊菌的濃度測定非常重要,制備過程嚴格控制不受污染,而且必須純菌檢查合格;

2、要注意在放入液氮前,一定要先緩凍,慢速冷卻會有充分的時間使細胞內的水分向外滲出達到平衡,快速冷卻沒有充分的時間使細胞內的水分向外滲出、脫水,加速細胞內冰晶增大,使細胞處于損傷狀態或潛在的損傷狀態;自增壓液氮罐

3、快速加溫融化不會在解凍過程中其冰晶損傷細胞,因此解凍時一般在3 分鐘左右為宜。在生產實踐中需不斷積累經驗、掌握操作技能,為提高制品質量,在攻擊菌的應用上尚有待進一步改進。
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